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方案一:
1. 将二粒颗粒药在开水中浸泡10分钟,然后连水一起放在均质袋中,另外在外面再套上一个均质袋。
2. 然后把此两层袋的颗粒置于无菌均质器上拍击,时间两分半,均质完毕。
3. 采用6-8次/秒。
结果:两层均质袋无泄漏。
方案二:
1. 将二粒颗粒药在冷水中浸泡10分钟,然后连水一起放在均质袋中,另外在外面再套一个均质袋。
2. 然后把此两层袋的颗粒置于均质器上拍击,时间3分钟,均质完毕。
3. 采用6-8次/秒。
结果:内袋破,外袋没漏,但表面已起趋(凹凸不平)
均质效果比较第一组因开水浸泡颜色比第二组稍微深一些。
结论:说明冷水浸10分钟,用两个均质袋,另即可达到均质的作用。
用无菌均质器获取大量单个细胞的方法(仅供参考):
将手术中切取的肿瘤组织(如胃癌、大肠癌、乳腺癌)放在无菌平皿中,用含有庆大霉素100U/ml的生理盐水洗涤,去除组织上粘附的细菌,洗3次后按2g重量加入10ml生理盐水,用剪刀剪成小块,尽量小些,2-5mm见方均可,装入均质袋中。
按无菌均质器使用说明书的方法进行操作,技术参数为10次/秒5-10分钟,每分钟停1分钟,计算累记分钟,不同组织使用时间稍有不同。再将处理后的组织混合物吸入试管中,静置3-5分钟,取澄清的部分细胞悬浊液,内含大量单个分散细胞,1000转/分离心5分钟,加入含20%小牛血清培养液,可以直接培养,细胞数可以调节在2×105ml左右,总细胞数随组织块大小可以有变化,但培养用细胞足够多。
观察到图片中单个圆形细胞为所需要的被分散的单细胞,包括腺体细胞及上皮类细胞,不规则梭形细胞为打散的肌纤维细胞,也是分散的单细胞。都有完整圆润的细胞形态,活性很好.
注意事项:
(1) 电源插头务必插紧到位,出现松动可能影响电脑控制器造成死机,如出现死机现象,请关闭后侧电源开关,关机3分钟后重新启动。
(2)在锤击板工作时请不要随意打开均质器门,以免样品液溢出。应按 ”开/停” 键,设备自动停止运行。当把门关上后,再按”开/停” 键,设备自动完成余下工作。
(3)仪器长期不使用应切断电源,拔去插头。
(4)无菌均质器门底部为防止均质袋意外破裂,便于清洗溢出物,底部设计为空的,可放置接水盘,所以仪器运转时请勿用手从底部伸入,以免绞伤手指。
(5)机器在运转前,请查看均质箱内有无异物,以免工作时发生故障和损伤均质袋。
(6)硬块、骨状、冰状物质不宜使用,以免破坏均质袋。
(7)仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直射,特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方,以免老化。
(8)量少时,需加快速度时,均质物纤维韧时,可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距,来达到更好的均质效果。
1. 将二粒颗粒药在开水中浸泡10分钟,然后连水一起放在均质袋中,另外在外面再套上一个均质袋。
2. 然后把此两层袋的颗粒置于无菌均质器上拍击,时间两分半,均质完毕。
3. 采用6-8次/秒。
结果:两层均质袋无泄漏。
方案二:
1. 将二粒颗粒药在冷水中浸泡10分钟,然后连水一起放在均质袋中,另外在外面再套一个均质袋。
2. 然后把此两层袋的颗粒置于均质器上拍击,时间3分钟,均质完毕。
3. 采用6-8次/秒。
结果:内袋破,外袋没漏,但表面已起趋(凹凸不平)
均质效果比较第一组因开水浸泡颜色比第二组稍微深一些。
结论:说明冷水浸10分钟,用两个均质袋,另即可达到均质的作用。
用无菌均质器获取大量单个细胞的方法(仅供参考):
将手术中切取的肿瘤组织(如胃癌、大肠癌、乳腺癌)放在无菌平皿中,用含有庆大霉素100U/ml的生理盐水洗涤,去除组织上粘附的细菌,洗3次后按2g重量加入10ml生理盐水,用剪刀剪成小块,尽量小些,2-5mm见方均可,装入均质袋中。
按无菌均质器使用说明书的方法进行操作,技术参数为10次/秒5-10分钟,每分钟停1分钟,计算累记分钟,不同组织使用时间稍有不同。再将处理后的组织混合物吸入试管中,静置3-5分钟,取澄清的部分细胞悬浊液,内含大量单个分散细胞,1000转/分离心5分钟,加入含20%小牛血清培养液,可以直接培养,细胞数可以调节在2×105ml左右,总细胞数随组织块大小可以有变化,但培养用细胞足够多。
观察到图片中单个圆形细胞为所需要的被分散的单细胞,包括腺体细胞及上皮类细胞,不规则梭形细胞为打散的肌纤维细胞,也是分散的单细胞。都有完整圆润的细胞形态,活性很好.
注意事项:
(1) 电源插头务必插紧到位,出现松动可能影响电脑控制器造成死机,如出现死机现象,请关闭后侧电源开关,关机3分钟后重新启动。
(2)在锤击板工作时请不要随意打开均质器门,以免样品液溢出。应按 ”开/停” 键,设备自动停止运行。当把门关上后,再按”开/停” 键,设备自动完成余下工作。
(3)仪器长期不使用应切断电源,拔去插头。
(4)无菌均质器门底部为防止均质袋意外破裂,便于清洗溢出物,底部设计为空的,可放置接水盘,所以仪器运转时请勿用手从底部伸入,以免绞伤手指。
(5)机器在运转前,请查看均质箱内有无异物,以免工作时发生故障和损伤均质袋。
(6)硬块、骨状、冰状物质不宜使用,以免破坏均质袋。
(7)仪器和均质袋的存放都应避免阳光的直射,特别是均质袋应存放在无阳光或避免紫外线照射的地方,以免老化。
(8)量少时,需加快速度时,均质物纤维韧时,可用后面旋钮调节拍击板与可视窗的间距,来达到更好的均质效果。